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HPLC分析中，堿性化合物的拖尾現象經常發生，而且堿性越強，拖尾發生的頻率越大。本期文章將分別探討造成堿性化合物拖尾的原因，并尋求相應的解決方案。

固定相、流動相、目標分析物是HPLC分析的3個基本的要素。堿性化合物的拖尾現象，與這三個要素息息相關，任何一個環節出在非理性狀態，都會導致拖尾現象出現。

導致堿性化合物拖尾的原因

由于C18碳鏈較長，空間位阻大的原因，導致鍵合率不高，殘留大量未被鍵合的硅羥基，硅羥基解離。

硅膠鍵合相容易溶解在堿性介質中，因此，大多數的反相HPLC方法都是在酸性或中性流動相條件下分析，堿性化合物在這種條件下，由于解離平衡的關系，便會以離子形式存在，帶正電荷，堿性越強，解離越容易。

由于游離的硅羥基與解離后堿性化合物產生的二級作用，導致堿性化合物出現拖尾現象。

拖尾解決方案

1、固定相的選擇

堿性化合物分析，選擇硅羥基活性的鍵合相是獲得良好峰形的關鍵。

全多孔色譜柱有A型硅膠和B型硅膠兩種。A型硅膠鍵合相，金屬殘留量較多，鍵合率較低，金屬離子的存在也會增強硅羥基的活度，使游離的硅羥基更容易解離。因此，分析堿性化合物時要避免使用A型硅膠色譜柱。相反，B型硅膠純度高，金屬殘留少，鍵合率增加、降低游離硅羥基活性，避免拖尾現象發生。

2、流動相的調節

（1） 使用離子對試劑，使形成中性離子對，增強堿性化合物的保留，改善堿性化合物的峰形，比如庚烷磺酸鈉、己烷磺酸銨、十二烷基磺酸鈉等。

（1） 使用“掃尾劑”，比如三乙胺、二乙胺，抑制堿性化合物的二級作用，可改善化合物峰形。

（2） 由于流動相pH值影響峰形及保留因子、選擇性，建議堿性化合物的流動相pH≤2.5，會有比較好的峰形。

（3） 合理選用緩沖鹽，改善化合物峰形，濃度需比樣品濃度高10倍以上，一般建議20~50mM使流動相維持穩定體系。

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